Wszystko w często wyrafinowane i dobrze wyposażone mikroskopy nie dają doskonałych obrazów z powodu nieprawidłowego użycia źródła światła, co zwykle prowadzi do nieodpowiedniego oświetlenia próbki. Po zoptymalizowaniu oświetlenie próbki powinno być jasne, wolne od blasku i równomiernie rozproszone w polu widzenia.
Istnieje wiele źródeł światła do oświetlenia mikroskopów, zarówno do rutynowej obserwacji, jak i krytycznej fotomikrografii. Najczęstszym źródłem światła, ze względu na jego niski koszt i długi czas, jest 50 lub 100 watów lampy halogenowej wolframu, jak pokazano u podstawy schematu mikroskopu na rycinie 1, która również szczegółowo opisuje szlaki optyczne w typowym nowoczesnym transmisji mikroskopu świetlnego. Na tej figurze lampa z halogenu wolframu emituje ciągłe spektrum światła wyśrodkowanego na 3200 K (po ustawieniu napięcia lampy woltów +9), które są następnie przepuszczane przez kolekcjoner i soczewkę pola, zanim zostanie odbijana w kondensatorze zastępczym i na specję. Promienie światła tworzące obrazy są przechwytywane przez cel mikroskopu i przekazywane albo do okularów lub skierowane przez rozpowszechnianie wiązki do jednego z kilku portów aparatu. W całym szlaku mikroskopu oświetlenie jest kierowane i skupione przez serię przepon i soczewek, gdy podróżuje ze źródła, aby oświetlić próbkę, a następnie do okularów lub mocowania kamery. Wyrównanie komponentów optycznych mikroskopu w celu optymalizacji oświetlenia w nowoczesnych mikroskopach przeprowadza się po zasadach oświetlenia Köhlera. Więcej szczegółów na temat tego, w jaki sposób zarówno transmitowane, jak i odbite mikroskopy świetlne są wyrównane dla Illumininacji Prawidłowych Króleczyków omówionych w naszych sekcjach dotyczących ustawienia mikroskopu porzuconego światła LightandRefled Light. Ścieżki optyczne pokazane powyżej na rycinie 1 są typowe dla transmitowanego mikroskopu świetlnego i obejmują szereg soczewek, przepony, luster i rozpowszechnianych promieniowania do kierowania światłem przez mikroskop.
Lampy z halogenu wolframu są stosunkowo jasne z widmem kolorowym wyśrodkowanym na 3200 K (po ustawianiu około +9 woltów), ale wymagają filtrów konwersji kolorów, aby podnieść temperaturę kolorów do równoważności światła dziennego. Kolejnym popularnym źródłem światła jest lampa ksenonowa 75 do 150 watów ze względu na jej bardzo wysoką jasność i długą żywotność, stosunkowo równomierne wyjście w spektrum wizualnym oraz temperatura kolorów, która przybliża, że wymagana przez emulsje filmowe w świetle dziennym. Tam, gdzie wymagana jest bardzo wysoka intensywność światła, często stosuje się lampy halidowe. WpływOncemikroskopia, szczególnie w celu krytycznej fotomikrografii, często stosuje się 100 watów lub 200 watowych palników rtęciowych. W poprzednich latach można było użyć świateł węglowych lub żarówek cyrkonu, ale źródła te są rzadko widoczne. Aby uzyskać więcej informacji i szczegółową dyskusję na temat szerokiego spektrum lamp dostępnych do oświetlenia mikroskopu, odwiedź naszą sekcję Onlight źródło mikroskopii i fotomikrografii.
Dostosowanie oświetlenia źródłowego poprzez szlaki optyczne w odbitnej mikroskopii świetlnej jest również przedmiotem głównego problemu, w szczególności w odniesieniu do metalografii, kontroli półprzewodników i niezwykłych nowych postępów w mikroskopii fluorescencyjnej. Odbudowane mikroskopy świetlne są również oświetlone różnymi źródłami światła (jak omówiono powyżej) i można je dostosować do optymalnej wydajności za pomocą oświetlenia Köhlera. Jest to omówione bardziej szczegółowo w naszej sekcji na temat konfiguracji oświetlenia Köhlera dla odbitego mikroskopii świetlnej. Ścieżki oświetlenia dla odbitego mikroskopii świetlnej są również tematem kilku interaktywnych samouczków Java, w tym tej połączonej bezpośrednio poniżej.
W swojej doskonałej książce „Fotografia przez mikroskop” John Dellyargues, że od 80 do 90 procent wszystkich fotomikrografów poddanych konkursom, wystawom i publikacjom naukowym są ofiarami niewłaściwie wyrównanych optyków, co powoduje słabe oświetlenie próbki. Jest to jeden z najczęstszych problemów z mikroskopią i fotomikrografią ogólnie, a niespodziewane badanie mikroskopów studenckich w wielu uniwersyteckich laboratoriach ujawni mnóstwo słabo skorygowanych skraplaczy zastępczych i źródeł oświetlenia. Podejrzewamy, że nieprawidłowe wyrównanie i dostosowanie zarówno kondensatora, jak i przepony pola, w całym zakresie celów w danym mikroskopie, jest największym źródłem błędów w fotomikrografii.
Konieczność właściwego oświetlenia nie można przecenić. Zbyt często mikroskop 25 USD, 000 jest zmniejszony do poziomu lupy ręcznej przez niewłaściwe oświetlenie i wyrównanie, co powoduje fotomikrografie, które są przewyższane przez te pobrane za pomocą mikroskopu za 2000 USD w optymalnych warunkach oświetlenia Kały. W sekcjach towarzyszących tego startera zajmującego się teorią oświetlenia Köhlera i jego wdrożeniem (oba fortransmittedandRefledlight) omawiamy krytyczne aspekty konfiguracji mikroskopu i zawarliśmy różnorodne interaktywne
